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人胚腎細(xì)胞 293T是實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用廣泛的,源于人胚胎腎細(xì)胞,經(jīng) SV40 大 T 抗原基因轉(zhuǎn)染改造而成,憑借易培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染效率高(可達(dá) 80%-90%)等特性,成為基因工程與生物制藥領(lǐng)域的 重要細(xì)胞。?
基因功能研究中,293T 細(xì)胞是外源基因表達(dá)的理想載體。其基因組穩(wěn)定且對(duì)重組質(zhì)粒的容納性強(qiáng),能高效表達(dá)目標(biāo)蛋白(如熒光蛋白、酶分子)。研究人員通過將含綠色熒光蛋白(GFP)基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入該細(xì)胞,可直觀觀察蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位與動(dòng)態(tài)變化。在 CRISPR-Cas9 基因編輯技術(shù)中,293T 細(xì)胞常被用于驗(yàn)證 sgRNA 的切割效率,通過檢測(cè)靶基因的突變率,篩選出編輯方案。某實(shí)驗(yàn)室利用該細(xì)胞驗(yàn)證了 3 種肺癌相關(guān)基因的敲除效果,一周內(nèi)就確定了有效的 sgRNA 序列,大幅縮短了實(shí)驗(yàn)周期。?

病毒載體生產(chǎn)中,慢病毒、腺病毒等基因治療載體需在該細(xì)胞中包裝:將載體質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染后,293T 細(xì)胞可組裝出具有感染性的病毒顆粒,病毒滴度可達(dá) 10?-10? TU/mL(轉(zhuǎn)導(dǎo)單位 / 毫升)。在 CAR-T 細(xì)胞療法研發(fā)中,慢病毒載體需通過 293T 細(xì)胞生產(chǎn),其高滴度病毒能確保 T 細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率超 70%,為療法的有效性提供保障。某生物公司利用該細(xì)胞生產(chǎn)的腺病毒載體,成功將凝血因子基因?qū)胙巡∧P蛣?dòng)物,使凝血功能恢復(fù)至正常水平的 60%。?
重組蛋白制備領(lǐng)域,293T 細(xì)胞能提供接近人類細(xì)胞的翻譯后修飾。與原核細(xì)胞(如大腸桿菌)相比,該細(xì)胞可對(duì)蛋白進(jìn)行糖基化、磷酸化等修飾,使生產(chǎn)的重組蛋白(如單克隆抗體、細(xì)胞因子)更接近天然構(gòu)象,生物活性更高。在新冠病毒研究中,科研人員通過 293T 細(xì)胞表達(dá)刺突蛋白(S 蛋白),用于制備中和抗體檢測(cè)試劑盒,其靈敏度比原核表達(dá)的蛋白提升 30%。某藥企利用該細(xì)胞生產(chǎn)的人干擾素 α,體外抗病毒活性達(dá) 10? IU/mg,遠(yuǎn)超酵母表達(dá)產(chǎn)品的 5×10? IU/mg。?
藥物篩選中,293T 細(xì)胞是快速評(píng)估藥效的模型。通過構(gòu)建含藥物靶點(diǎn)基因的穩(wěn)定細(xì)胞系(如表達(dá) EGFR 的 293T 細(xì)胞),可高通量篩選抑制劑的活性。在抗腫瘤藥物研發(fā)中,該細(xì)胞模型能在 96 孔板中同時(shí)檢測(cè)數(shù)十種化合物對(duì)靶點(diǎn)蛋白的抑制效果,IC50(半數(shù)抑制濃度)測(cè)定的 Z' 因子(實(shí)驗(yàn)可靠性指標(biāo))可達(dá) 0.7 以上,確保篩選結(jié)果可靠。某團(tuán)隊(duì)利用該模型篩選出 3 種新型 ALK 抑制劑,為非小細(xì)胞肺癌治療提供了候選藥物。?
此外,人胚腎細(xì)胞 293T因培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單(含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,37℃、5% CO?環(huán)境)、傳代穩(wěn)定(可連續(xù)傳代 50 次以上),成為教學(xué)實(shí)驗(yàn)中的常用材料,幫助學(xué)生直觀理解細(xì)胞轉(zhuǎn)染、蛋白表達(dá)等基礎(chǔ)生物學(xué)過程。其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的多功能性,使其成為連接基礎(chǔ)研究與臨床應(yīng)用的重要橋梁。